注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
豬鏈球菌通用PCR檢測(cè)試劑盒原理 |
英文名稱 |
Streptococcus suiPCR |
貨號(hào) |
BJ-R014232 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開(kāi)發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無(wú)交叉反應(yīng),無(wú)非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測(cè)靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡(jiǎn)便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時(shí)進(jìn)行多個(gè)檢測(cè);
◇高通量:多種雙重PCR檢測(cè)以及三重PCR檢測(cè)試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動(dòng)化核酸提取儀等,具體提取方法請(qǐng)參照相關(guān)說(shuō)明書(shū);陽(yáng)性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無(wú)需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(gè)(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽(yáng)性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個(gè)PCR反應(yīng)管)。
豬鏈球菌通用PCR檢測(cè)試劑盒原理組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽(yáng)性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
豬Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢ)ELISAKit
tert-Butyl4'-(bromomethyl)biphenyl-2-carboxylate 中文名: 分子式:C18H19BrO2 度:93.0%
豬Ⅲ型膠原PCR檢測(cè)試劑盒 豬Ⅲ型膠原試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬Ⅲ型膠原試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:PCR檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬Ⅲ型膠原試劑盒、豬Ⅲ型膠原eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
Testosterone 中文名: 分子式:C19H28O2 度:98.0%
豬Ⅲ型膠原(ColⅢ)PCR檢測(cè)試劑盒
Testosterone acetate 中文名:醋酸 分子式:C21H30O3 度:98.0%
豬Ⅲ型膠原(ColⅢ)ELISAKit Tenuifoliside A 139726-35-5 中文名:遠(yuǎn)志蔗糖酯A 分子式:C31H38O17 度:95.0% 關(guān)鍵詞: 抗抑郁; 遠(yuǎn)志; 蔗糖; 中藥對(duì)照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫(kù)
豬Ⅰ型前膠原羧基端肽PCR檢測(cè)試劑盒 豬Ⅰ型前膠原羧基端肽試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬Ⅰ型前膠原羧基端肽試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:PCR檢測(cè)試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬Ⅰ型前膠原羧基端肽試劑盒、豬Ⅰ型前膠原羧基端肽PCR檢測(cè)試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。 Testosterone benzoate 中文名:17-安息香酸雄烯醇酮 分子式:C26H32O3 度:98.0%
Makisterone A
20,22-monoacetonide 中文名: 分子式:C31H50O7 度:% 兔素(Renin)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Glaucogenin C
mono-D-thevetoside 中文名: 分子式:C28H40O9 度:98.0% 兔神經(jīng)生長(zhǎng)因子(NGF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
17α-Estradiol 中文名:17α-雌二醇 分子式:C18H24O2 度:99.0% 兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
Stauntosaponin
A 中文名: 分子式:C28H38O7 度:97.0% 兔熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒
Ergosta-7,22-dien-3-one 中文名:麥角甾-7,22-二烯-3-酮 分子式:C28H44O 度:95.0% 兔素(Renin)ELISAKit ELISA. 96T/48T
象皮樹(shù)Alstonia scholaris Scholaricine 燈臺(tái)樹(shù)次堿 99694-90-3 C20H24N2O4 ≥95%
牛蒡子苷crctiin20mg/支
常春藤皂苷B Hederasaponin B 36284-77-2 20mg HPLC≥98% 用于含量測(cè)定
含量測(cè)定扶比洛芬酯100696-200401常溫,避光200mg
丙戊酸相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品62391-99-5 50mg