注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱: 溶藻弧菌PCR檢測試劑盒說明書
英文名稱: 詳見說明
產(chǎn)品貨號: BJ-R014682
產(chǎn)品規(guī)格: 50T
產(chǎn)品分類: PCR熒光定量檢測試劑盒
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點:本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點:
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
溶藻弧菌PCR檢測試劑盒說明書組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠抗心肌抗體(AMA)ELISAKit Enalapril maleate 中文名:馬來酸依那普利 分子式:C24H32N2O9
小鼠抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISA試劑盒
Escitalopram oxalate 中文名:草酸西酞普蘭 分子式:C22H23FN2O5 度:99.0%
小鼠抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)ELISAKit Erythritol 中文名:赤蘚糖醇 分子式:C4H10O4
小鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISA試劑盒
Escitalopram oxalate 中文名:草酸西酞普蘭 分子式:C22H23FN2O5
小鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)ELISAKit Erythritol 149-32-6 中文名:赤蘚糖醇 分子式:C4H10O4 度:% 關(guān)鍵詞: 中藥對照品; 中藥標(biāo)準(zhǔn)品; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫
補(bǔ)骨脂色烯查耳酮 HPLC≥95% 20mg 低分子蛋白標(biāo)準(zhǔn)樣100
異補(bǔ)骨脂色烯查耳酮 HPLC≥95% 20mg
RatOsteopoin,OPNELISA試劑盒大鼠骨橋素(OPN)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
異新補(bǔ)骨脂異黃酮 HPLC≥95% 20mg 小鼠細(xì)胞骨架活性調(diào)節(jié)蛋白(ARC)ELISA試劑盒 ,英文名: ARC ELISA Kit
羥基羽扇豆鹼 HPLC≥95% 20mg 兔抗內(nèi)皮細(xì)胞抗體(AECA)ELISA檢測試劑盒RabbitAi-endothelialcellaibodies,AECAELISAKit
96T/48T
靈芝酸TR HPLC≥95% 20mg 牛雄(ASD)試劑盒 Bovine Androstenedione,ASD ELISA Kit
靈芝烯酸A HPLC≥95% 20mg 英文名稱HumanAT-IIIELISAKit人抗凝血酶(AT-III)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
靈芝酸TQ HPLC≥95% 20mg 低內(nèi)小量質(zhì)粒抽提試劑盒20/50
靈芝烯酸C HPLC≥95% 20mg
RatOsteoprotegerinLigand,OPGLELISA試劑盒大鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Delta avenasterol
HPLC≥95% 20mg 小鼠細(xì)胞分裂周期因子25(CDC25)ELISA試劑盒 ,英文名: CDC25 ELISA Kit
Delta avenasterol HPLC≥95% 20mg 兔抗平滑肌抗體(ASMA)ELISA檢測試劑盒RabbitAi-SmoothMuscleAibody,ASMAELISAKit 96T/48T
羊藿苷 Glycine 489-32-7 20mg
木糖醇Xylitol87-99-020mg
1-Acetoxy-9,17-octadecadiene-
12,14-diyne-11,16-diol 1-乙酰氧基-9,17-十八碳二烯-12,14-二炔-11,16-二醇 213905-35-2
芒柄花苷刺芒柄花苷486-62-4Ononin
人參三醇;Panaxaiol 32791-84-7 20mg 訂購|咨詢