注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。產(chǎn)品僅用于科研
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱 |
豬流行性腹瀉病毒(PEDV)核酸試劑盒圖片 |
英文名稱 |
詳見說明 |
貨號 |
BJ-R014877 |
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
產(chǎn)品特點(diǎn):本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計(jì)引物而開發(fā)的高靈敏熒光定量 PCR 產(chǎn)品。
產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。

實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
注:所有試劑使用前需完全解凍,混合均勻,6,000rpm離心數(shù)秒后使用。
1. 樣本處理(樣本處理區(qū))
待檢樣本的核酸提取可采用病毒RNA提取試劑盒或自動化核酸提取儀等,具體提取方法請參照相關(guān)說明書;陽性質(zhì)控品及陰性質(zhì)控品無需提取,可直接使用。
2. 擴(kuò)增試劑準(zhǔn)備(PCR前準(zhǔn)備區(qū))
取N個(N=陰性質(zhì)控品+待檢樣本+陽性質(zhì)控品)PCR反應(yīng)管,每管分別加入FMD RT-PCR反應(yīng)液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根據(jù)每頭份用量計(jì)算N+1份FMD RT-PCR反應(yīng)液、RT-PCR酶所需總量,兩者混勻離心后分裝20 μl至單個PCR反應(yīng)管)。
豬流行性腹瀉病毒(PEDV)核酸試劑盒圖片組分每頭份用量FMD RT-PCR反應(yīng)液19 μlRT-PCR酶。
1 .將所有PCR反應(yīng)管于6,000rpm離心30s,轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
2.加樣(樣本處理區(qū))
3.在上述的PCR反應(yīng)管中分別加入待檢樣本RNA提取物、陰性質(zhì)控品和陽性質(zhì)控品各5 μl,蓋緊管蓋,于6,000rpm離心10s,轉(zhuǎn)移至擴(kuò)增區(qū)。
小鼠p53elisa試劑盒 小鼠p53試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠p53試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠p53試劑盒、小鼠p53eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Benzyl
nicotinate 94-44-0 中文名:煙酸芐酯 分子式:C13H11NO2
小鼠P53(P53-ab)ELISA試劑盒 Benzyl
nicotinate 中文名:煙酸芐酯 分子式:C13H11NO2 度:98.0%
小鼠p53(p53)ELISA試劑盒 Benzyl nicotinate 中文名:煙酸芐酯 分子式:C13H11NO2
小鼠p53(p53)ELISAKit Enalapril maleate 76095-16-4 中文名:馬來酸依那普利 分子式:C24H32N2O9
小鼠N-乙酰基-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯酸elisa試劑盒 小鼠N-乙?;?span lang="EN-US">-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯酸試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 小鼠N-乙?;?span lang="EN-US">-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯酸試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:小鼠N-乙?;?span lang="EN-US">-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯酸試劑盒、小鼠N-乙?;?span lang="EN-US">-絲酰-天門冬酰-賴酰-脯酸eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。 Benzoyl-DL-valine 中文名:苯甲酰-DL-纈氨酸 分子式:C12H15NO3 度:98.0%
肝素鈉/肝磷脂鈉鹽 Heparin 質(zhì)量規(guī)格:細(xì)胞培養(yǎng)級,效價≥180IU/mg 豬胰島素樣生長因子1(IGF-1)ELISA檢測試劑盒Porcineinsulin-likegrowthfactors-1,IGF-1ELISAKit
96T/48T
羥乙基-β-環(huán)糊精 HE-β-CD 質(zhì)量規(guī)格:BR,>98%,藥用級 大鼠周脂素(Plin1/Peri/Plin)試劑盒 Rat
Perilipin-1,Plin1/Peri/Plin ELISA kit
奈福泮/鹽酸平痛新 Nefopam HCl 質(zhì)量規(guī)格:>99%,CP 英文名稱HumanIL-11ELISAKit人白介素-11(IL-11)規(guī)格:96T/48T
甲氨蝶呤二鈉鹽
Methotrexate di 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng) 動物直腸組織細(xì)胞分離培養(yǎng)試劑盒10
甲氨蝶呤二鈉鹽 (標(biāo)準(zhǔn)品) Methotrexate di 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品 Ratα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISA試劑盒大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
鹽酸沙氟沙星;鹽酸沙拉沙星 Sarafloxacin HCl 質(zhì)量規(guī)格:>97%,BR 小鼠染色質(zhì)域解旋酶DNA結(jié)合蛋白4(CHD4)ELISA試劑盒 ,英文名: CHD4 ELISA Kit
鹽酸沙氟沙星;鹽酸沙拉沙星(標(biāo)準(zhǔn)品) Sarafloxacin
HCl 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98.0%,標(biāo)準(zhǔn)品 豬胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA檢測試劑盒Porcineinsulin-likegrowthfactors2,IGF-2ELISAKit
96T/48T
甲硫二苯馬尼/二苯馬尼甲硫酸鹽 Diphemanil mesylate 質(zhì)量規(guī)格:>98% 大鼠周期素依賴性激酶5(CDK5)試劑盒 Rat
Cyclin Depende Kinase 5,CDK5 ELISA Kit
甲硫二苯馬尼(標(biāo)準(zhǔn)品) Diphemanil mesylate 質(zhì)量規(guī)格:>98%,標(biāo)準(zhǔn)品 英文名稱HumanIL-10ELISAKIT人白介素10(IL-10)ELISAKIT規(guī)格:96T/48T
吡嗪-2-羧酸,吡嗪單羧酸 2-Pyrazinecarboxylic acid 質(zhì)量規(guī)格:含量98%,化學(xué) 動物指(趾)甲DNA萃取試劑盒20
人脂多糖結(jié)合蛋白(LBP)ELISAKit 2-Benzylsuccinic acid 3972-36-9 中文名: 分子式:C11H12O4 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人脂多糖elisa試劑盒 人脂多糖試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人脂多糖試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人脂多糖試劑盒、人脂多糖elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
2-Benzylacrylic acid
5669-19-2 中文名: 分子式:C10H10O2 度:98.0% 關(guān)鍵詞:
人脂多糖/內(nèi)(LPS)ELISA試劑盒
2-Benzylsuccinic acid 中文名: 分子式:C11H12O4 度:98.0%
人脂蛋脂酶A2elisa試劑盒 人脂蛋脂酶A2試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 人脂蛋脂酶A2試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,來源:elisa試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:人脂蛋脂酶A2試劑盒、人脂蛋脂酶A2
elisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
2-Benzyl-2-(dimethylamino)-4'-morpholinobutyrophenone 中文名:2-芐基-2-(二甲基氨基)-4'-嗎啉基苯基丁酮 分子式:C23H30N2O2
人脂蛋脂酶A2(Lp-PL-A2)ELISA試劑盒 2-Benzoylbenzoic acid 85-52-9 中文名:2-苯甲酰苯甲酸 分子式:C14H10O3 度:98.0%